于是我给出建议：“每个基因片段分别构建携带3个蛋白载体标签的表达载体，常见的就见的促表达标签TrxA标签，MBP标签和GST标签。”
博士愣了一下，之前可能接触这方面的工作不多。有点不好意思地说：“你刚才说的那几个标签我没有记下来！，我加你微信你发给我”
“你先把我说的记下来，我再加你微信！”我撩了他一下。
博士不说话了，我怕把他撩尴尬了，我说：“逗你玩的，你加我微信，我发给你！”
我又问道：“密码子优化了没有？”
博士说：“优化了！”
我继续解释道：“一般分子量在25-70kDa经过密码子优化的蛋白在大肠杆菌中相对容易表达，但是让它自己独立完成表达通常不太容易，非要有人领进门，常用的载体促溶蛋白标签有TrxA标签，Map标签和GST标签。他们对应的载体分别是TrxA标签（pET-32a）MBP标签（ pMal-c2x）,GST标签（pET-41a(或者pGEX-4T-1)）。”
“构建好这些表达载体，同时分别转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达，择优选取用于蛋白纯化。”我补充道。
“如果你实在不喜欢标签蛋白，在后续想办法把它切掉；不想切或者不方便切的，在做实验的时候用标签蛋白做个对照。”我继续补充。
这剂药方基本可以解决目前的症状，我最后又补充了一句
“做完这些，如果还有问题再联系我！”
其实，我还想说的是表达成功只是万里长征第一步，纯化才是真正的 ' 修罗场 '。最磨人的不是 ' 表达不出 '，而是 ' 看得见却摸不着 '—— 等你走到那步，咱们再细聊蛋白纯化的弯弯绕绕。
最后，我还是忍住了没说，不能吓唬小孩子。
挂掉电话，我看了一眼办公桌上的蛋白电泳胶。每个做蛋白表达的人，大概都要经历这样的 "望闻问切"—— 用经验当听诊器，在载体与菌株的组合中，为蛋白找到最合适的 "表达栖息地"。
